동적 BIOSENSORS heliXcyto 정규화 솔루션 사용자 매뉴얼

연구용으로만 사용하세요.

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분석 물질 라벨 색상에 해당하는 정규화 솔루션 색상(Ga 또는 Ra)을 선택합니다. 실행 중인 버퍼를 사용하여 10 μM 정규화 스톡 솔루션을 작업 농도로 희석합니다.

실험에 필요한 최종 부피는 heliOS s에서 확인할 수 있습니다.amp르 트레이 view 분석의.

정규화 용액의 농도는 측정할 최고 분석물질 농도의 형광단 농도와 대략적으로 일치해야 합니다. 이는 다음 방정식을 사용하여 계산할 수 있습니다.

: 원하는 색상의 노말라이제이션 용액 농도
: 표지된 분석물 용액 내 염료의 농도
: 측정해야 하는 분석물의 최고 농도
: 표지 정도(염료와 분석물질의 비율)

희석된 용액은 2~8°C에서 최대 7일 동안 보관할 수 있습니다.

중요한: 이중 색상 측정(녹색 및 빨간색 채널의 병렬 판독)을 설정하지 않는 한 정규화 솔루션-Ra와 정규화 솔루션-Ga를 함께 혼합하지 마십시오.

RT-IC 측정에서 정규화 용액의 형광 신호는 비슷한 범위 결합된 분석물(원시 데이터)에서 나오는 가장 높은 신호입니다.

절대 형광 신호는 정규화 용액 농도와 측정에 적용되는 여기 전력에 따라 달라집니다. 여기 전력은 다음 매개변수를 기반으로 선택해야 합니다.

a. 분석 용액의 형광단 농도:
형광단 농도는 측정에 사용된 분석물질 농도와 분석물질의 표지 정도에 따라 달라집니다. 높은 DOL 및 높은 분석물 농도의 경우 여기 전력을 낮추는 것이 필요할 수 있습니다.

b. 예상되는 결합 신호:
세포에서 고도로 발현된 표적은 표지된 분석물질의 더 많은 분자를 결합할 수 있습니다. 고도로 과발현된 표적의 경우 강한 결합 신호가 예상될 수 있습니다. 셔터가 닫히는 것을 방지하려면 여기 전력을 낮추는 것이 고려될 수 있습니다.

c. 칩 유형:
칩 유형마다 형광 배경이 다릅니다. 트랩이 더 크고 칩에 트랩이 많을수록 배경 신호가 높아집니다. 따라서 L5 칩은 M5 칩에 적용되는 것보다 더 낮은 여기 전력을 요구할 수 있습니다.

여기 전력 및 표준의 시작점입니다. RT-IC 실험에 사용되는 용액 농도는 표 2를 참조하십시오.

테이블 2. heliX cyto M5 칩에 적합한 형광단 농도, 정규화 용액 농도 및 여기 전력의 관계

메모: 이 표는 귀하의 안내를 위한 것입니다. 그러나 heliX cyto에 기록된 최종 신호는 여러 요인에 따라 달라집니다. 따라서 각 시스템마다 일부 최적화가 필요합니다.